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基因表达水平在不典型膜性肾病患者中显著升高，且对患者水平血液凝固状态有定影响，关键词，基因，表达，不典型膜性肾病，血清骨桥蛋白，血栓弹力图中图分类号，文献标志码，文章编号，①收稿日期，基金项目，河北省医学科学研究课题计划项目，沧州市重点研发计划指导项目，作者简介，赵翠，硕士研究生，主治医师，主要从事肾脏病的研究，通信作者万，方贾数利据敏，副主任医师，第期赵翠，等，基因在不典型膜性肾病患者中的表达意义及对水平血栓弹力图的影响，膜性肾病依据发病机制可分为不典型膜性肾病原发性膜性肾病继发性膜性肾病等。

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临床表现为肾病综合征大量蛋白尿低蛋白血症高度水肿高脂血症，或无症状非肾病范围的蛋白尿，病程中可出现肾功能不全高血压等，不典型膜性肾病是指病因不明确的膜性肾病，且患者患病率明显升高，基因是种与衰老有关的基因，研究显示其与肿瘤细胞生长转移凋亡等均有定关系，但其对肾病患者的作用机制尚不清楚，血清骨桥蛋白可由人体内多种细胞合成分泌，可积极调节机体器官组织的发育，此外，肾病综合征患者常见血液高凝状态，血栓弹力图指标可准确检测患者凝血因素异常情况，本研究利用免疫组织化学法对基因表达情况进行检测，并探讨其对患者血栓弹力图的影响，材料与方法，实验材料设年月至年月沧州市人民医院医专肿瘤院。

区肾内科收治的例肾穿刺活检标本诊断为不典型膜性肾病患者为观察组，同时纳入例尸解未出现明显肾脏病变的肾组织标本为对照组，观察组标本经福尔马林固定，行石蜡包埋切片，对照组标本经，戊二醛进行固定，使用包埋，本研究已获沧州市人民医院伦理委员会通过伦批，方法，染色免疫组化染色试剂盒购自赛默飞世尔，对照组使用溶液代替抗，严格按照说明书进行染色，①脱蜡至水，②使用蒸馏水配制甲醇过氧化氢，并使用蒸馏水洗次，③使用微波抗原修复，④滴加兔抗人抗，下过夜，使用溶液洗次，滴加生物素化山羊抗兔，室温下反应，使用溶液洗次，⑤滴加复合物，室温下反应，⑥加入试剂，使用苏木素复染，脱水封片，基因原位杂交试剂盒购自赛默飞世尔，严格按照说明书进行操作，①石蜡切片后经酒精脱蜡入水，加入室温下反应，使用蒸馏水洗次，②滴加柠檬酸及滴浓缩胃蛋白酶，于下反应。

使用溶液进行清洗，共次，次，蒸馏水清洗次，③滴加预杂交液，于下反应，滴加杂交液，于下反应过夜，使用进行清洗，④于下滴加封闭液，后甩去多余液体，并滴加溶液，下反应，使用溶液洗次，次，⑤滴加生物素化过氧化物酶，下反应，使用溶液清洗次，次，⑥显色，加入苏木素复染，脱水封片，图像分析对两万组方患数者据免疫组化染色切片及杂交染色切片进行检测，检测范围为肾小管及肾小球，每张切片随机西南师范大学学报自然科学版，第卷选取个肾小球，并选取个视野进行检测，分别检测肾小球及肾小管的吸光度值，并以平均值进行计算，分组根据观察组细胞染色强度与阳性细胞比例进行计分，染色强度可以分为分，分为阴性，分为淡黄色颗粒，分为棕黄色颗粒，分为褐色颗粒，阳性细胞水平评分，分，阳性细胞，分，分，分，分，将两项分数相乘得到分组标准，将乘积分记为阴性组。

其余记为阳性组，水平及血栓弹力图使用，高压锅抗原修复，使用抗孵育过夜，加入二抗进行孵育，加入氧化物酶液链霉素抗生物素进行孵育，加入显色，使用苏木素染色，加入，盐酸乙醇进行分化，脱水封片，使用血栓弹力图分析仪武汉中科和信生物技术有限公司检测阴性组阳性组血栓弹力，检测指标包括凝血时间凝血指数最大血栓弹力度凝固角，统计学方法使用，统计学软件对患者数据进行分析，计数资料使用检验，用例数和表示，计量资料使用检验，用表示，为差异有统计学意义，结果，两组基因蛋白量比较对照组肾小管上皮细胞仅为微弱阳性反应，阳性颗粒仅见于肾小管上皮细胞胞浆内，肾小球为阴性反应，肾小球间质内未见明显阳性反应，观察组患者基因呈强阳性表达，与对照组相比，差异有统计学意义，见表，表两组基因蛋白量比较组别例数肾小球肾小管对照组。

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